O colágeno é um componente intersticial extracelular, que existe no corpo como uma estrutura macromolecular insolúvel e é combinado com polissacarídeos proteicos, glicoproteínas, etc. pré-tratamento, extração de colágeno, separação e purificação de diferentes tipos de colágeno, entre os quais a extração de colágeno é o mais crítico.
Seleção de material tecidual e pré-tratamento
O material de tecido usado para extração de colágeno deve ser cuidadosamente pré-tratado, o mais importante é raspar apêndices não colágenos, como carne picada, gordura, etc., e extrair a gordura com um solvente orgânico para evitar acabar com gordura contendo leite de colágeno. líquido turvo. Após a remoção adicional de cálcio no tecido ósseo e proteoglicano no tecido cartilaginoso, o material do tecido pode ser fatiado, esmagado ou homogeneizado para extração de colágeno.
Extração de colágeno de origem animal
Tradicionalmente, o colágeno é extraído principalmente das peles e ossos de animais terrestres, como porcos e bovinos. Recentemente, descobriu-se que a pele, os ossos e as escamas dos peixes também são ricos em colágeno. A extração de colágeno de tecidos de animais aquáticos pode não apenas aproveitar ao máximo os recursos aquáticos e aumentar o valor agregado do processamento de produtos aquáticos, mas também reduzir a poluição e ser mais ecológico. Ao mesmo tempo, devido à existência de doenças do gado, como a doença da vaca louca e a febre aftosa, as pessoas estão mais dispostas a acreditar que o colágeno aquático tem maior segurança do que o colágeno derivado do gado. Portanto, a extração de colágeno de resíduos da aquicultura, como peles, escamas e ossos de peixes, está ganhando cada vez mais atenção.
Protocolos comuns de extração de colágeno:
O método de extração ácida é um método de extração no qual as matérias-primas são pré-tratadas por imersão em ácido e depois purificadas por uma série de operações, como centrifugação. Ácidos comuns incluem ácido clorídrico, ácido oxálico, ácido acético, ácido acético, ácido cítrico e ácido lático. A gordura ligada sofre uma reação de saponificação com uma solução alcalina para remover o peptídeo terminal não helicoidal e dissolver as fibras de colágeno. Hidróxido de sódio, carbonato de sódio e hidróxido de cálcio são frequentemente usados como agentes de tratamento alcalino. Sob condições alcalinas, as ligações peptídicas do colágeno são facilmente hidrolisadas e sua estrutura superenrolada será destruída. Portanto, existem poucos estudos sobre a extração de colágeno pelo método alcalino. Dissolve-se em soluções ácidas ou soluções salinas neutras. Uma das razões pelas quais o colágeno extraído enzimaticamente é amplamente utilizado em materiais biomédicos é seu baixo desempenho imunológico, e as enzimas frequentemente utilizadas incluem tripsina, pepsina, papaína e protease neutra.
Como fazer colágeno em casa?
O colágeno é a fibrina mais importante em couros crus e é o principal componente da pele animal.
1. Usando couro bovino como matéria-prima, através das etapas de pré-tratamento de couro bovino, adição quantitativa de soda cáustica, ajuste de pH, adição de protease alcalina, lixiviação, coleta de filtrado, salga, centrifugação da precipitação e liofilização, o colágeno sólido do couro bovino de iaque é finalmente extraído. Para produtos proteicos, as condições ideais de preparação do colágeno da pele de iaque determinadas pelo teste ortogonal são uma relação sólido-líquido de lixiviação de 1:35 (g:mL), dosagem de protease de 1,5 por cento (fração de massa) e tempo de lixiviação de 12 h , tempo de lixiviação de A temperatura foi aumentada para 36 graus.
2. O processo de extração de colágeno de pele de porco é o seguinte: adicionar 0,1 mol/L de solução de NaOH na proporção de 1:10 (g:mL), embeber e desengordurar por 6 h, hidrólise enzimática por 24 h, adicionar gota a gota solução de cloreto de sódio completamente dissolvido para salga, seguido de diálise e purificação do colágeno com solução de ácido acético e água deionizada e liofilizado para obter amostras de colágeno.
3. As etapas da operação de extração de colágeno da pele de peixe pelo método ácido e método de extração enzimática são mostradas na figura: